The CAR-T ląstelės kieti navikai Po Kolumbijos universiteto atliktų ikiklinikinių tyrimų serijos, rodančios paradigmos pokytį, jie vėl atsidūrė mokslinių diskusijų centre. Tyrimų rinkinys, paskelbtas žurnale „... Mokslas apibūdinti itin jautri šių ląstelių terapijos versija galintis eksperimentiniuose modeliuose aptikti ir sunaikinti inkstų, kasos ir kiaušidžių navikus – tai, kas iki šiol buvo laikoma praktiškai nepasiekiama.
Tuo metu, kai CAR-T terapija jau yra klinikinės praktikos dalis kelioms šalims. hematologinis vėžys Ispanijoje ir likusioje Europoje šie rezultatai vėl atveria diskusijas apie kaip taikyti šią strategiją kietųjų organų vėžiui gydytikurie sudaro didžiąją daugumą vėžio diagnozių. Ekspertai palankiai vertina pažangą, tačiau įspėja, kad tai yra ikiklinikiniai tyrimai, ir ragina būti atsargiems: klausimai dėl jų lieka neatsakyti. toksiškumas, reguliavimas, išlaidos ir pacientų atranka.
Kodėl CAR-T terapija nepavyko gydant solidinius navikus
CAR-T ląstelių terapija atsirado kaip „Gyvoji medicina“T limfocitai išskiriami iš paties paciento kūno, laboratorijoje modifikuojami taip, kad atpažintų specifinį vėžio baltymą, o po to vėl įvedami, kad būtų galima surasti ir sunaikinti naviką. Ši strategija pakeitė įvairių leukemijų ir limfomų eigą, pasiekdama ilgalaikę remisiją net žmonėms, kurie buvo išnaudoję kitus gydymo būdus.
Tačiau šuolis iš kraujo į kietuosius organus Tai problema jau daugiau nei dešimtmetį. Skirtingai nuo hematologinių vėžio atvejų, kai beveik visos naviko ląstelės vienodai turi tą patį paviršiaus taikinį (pvz., CD19), kietieji navikai pasižymi... didelis heterogeniškumasKai kurios ląstelės ekspresuoja daug tikslinio antigeno, kitos – labai mažai, o dar kitos, regis, jo visai neekspresuoja. Dėl tokios „mozaikos“ dalis naviko gali lengviau likti už terapijos ribų ir galiausiai atsinaujinti.
Be to, pati naviko mikroaplinka atlieka ir funkciją. „Pilį“ sunku šturmuotiFiziniai barjerai trukdo T ląstelėms patekti į organizmą, imunosupresiniai signalai jas mažina, o uždegiminė aplinka riboja jų išgyvenimą. Esant tokiai situacijai, pirmieji bandymai su CAR-T ląstelėmis, nukreiptomis prieš solidinius navikus, davė kuklius ir daugeliu atvejų nuviliančius rezultatus.
Vienas iš baltymų, kuris buvo siūlomas kaip galimas taikinys, buvo CD70, kurio buvimas buvo aptiktas keliose karcinomose, ypač inkstų, kiaušidžių, smegenų ir kasos augliaiProblema ta, kad tradiciniai tyrimai parodė, jog tik dalis kiekvieno naviko ląstelių ekspresuoja CD70, o tai riboja jo, kaip vienintelio terapinio taikinio, naudingumą. Pavyzdžiui, klinikiniai tyrimai su anti-CD70 CAR-T ląstelėmis metastazavusios inkstų ląstelių karcinomos atveju parodė mažą objektyvaus atsako dažnį – nuo 6% iki 21%.
CD70, nuo „netaisyklingo“ taikinio iki panauginio tikslo
Imunologo vadovaujama komanda Michelis SadelainasIstorinė asmenybė, prisidėjusi prie CAR-T terapijos kūrimo, nusprendė nuodugniai peržiūrėti CD70 vaidmenį. Tyrėjas Sofija Hanina Viskas prasidėjo nuo paprastos, bet novatoriškos hipotezės: galbūt daugelis ląstelių, laikomų „CD70 neigiamomis“, turėjo baltymą, bet tokiu mažu kiekiu, kad jų nepavyko atpažinti net naudojant įprastus aptikimo metodus ir naudojant įprastas CAR-T ląsteles.
Per pažangi mikroskopija ir fluorescencijos analizę pacientų sukurtuose modeliuose (ksenograftuose), grupė nustatė, kad situacija nebuvo tokia dvejetainė, kaip manyta anksčiau. Susiformavo CD70 raiška ištisinis spektrasNuo labai didelių iki beveik nepastebimų, bet esamų kiekių. Net ląstelės, kurios atrodė neigiamos, rodė daugiau CD70 nei tos, kuriose genas buvo visiškai pašalintas laboratorijoje.
Tyrime taip pat gilinamasi į šios labai žemos raiškos mechanizmą. Autoriai šį reiškinį sieja su EZH2 tarpininkaujamas epigenetinis nutildymas ir histono žymuo H3K27me3, susijęs su genų represija. Ląstelėse, kuriose CD70 kiekis labai sumažėjęs, šių represinių signalų sustiprėjimas buvo pastebėtas genų promotoriuje. Kai EZH2 buvo slopinamas, CD70 ekspresija padidėjo, o tai sustiprina mintį, kad navikas iš dalies „išjungia“ taikinį, kad išvengtų imuninės sistemos.
Remiantis šiais duomenimis, tyrime siūloma iš naujo interpretuoti klasikinį naviko „heterogeniškumą“: vietoj navikų, kurių ląstelės yra visiškai teigiamos arba neigiamos CD70 atžvilgiu, būtų epigenetiškai reguliuojama gradacijaTai leidžia mums atkurti CD70 koncepciją kaip panvėžinis taikinys su sąlyga, kad yra receptorių, galinčių aptikti net ir tuos likutinius kiekius.
HIT: naujos kartos itin tikslūs imtuvai
Raktas į pažangą slypi būtent šiame naujo tipo imtuve. „Columbia“ grupė sukūrė vadinamąjį HIT ląstelės (nuo HLA nepriklausomi T ląstelių receptoriai), įprastinių CAR-T ląstelių evoliucija, kuri daug geriau imituoja natūralų T ląstelių antigenų atpažinimo būdą.
Skirtingai nuo tradicinių automobilių, kuriems reikia santykinai didelis tikslinio antigeno tankis Norėdami aktyvuoti, HIT receptoriai yra sukurti reaguoti į kiekius CD70 „itin žemas“ dažnisAutoriai šias ląsteles apibūdina kaip savotišką „didelio tikslumo jutiklį“, galintį aptikti „šnabždesį“ ten, kur anksčiau buvo girdimi tik „šauksmai“.
Siekdami dar labiau pagerinti savo veiklą, tyrėjai sujungė HIT receptorius su kostimuliacinės molekulės, tokios kaip CD80 ir 4-1BBLŠis dvigubas signalizavimas sustiprina T ląstelių aktyvaciją ir pagerina jų atsparumą nepalankiai naviko aplinkai, sumažindamas ankstyvo išsekimo riziką. Sadelain apibendrina šią koncepciją pabrėždamas, kad CAR-T ląstelės ir jų dariniai yra „Gyvieji vaistai“, kurie gali išsiplėsti paciento viduje, kitaip nei taikant tradicinį cheminį gydymą, kurį organizmas pašalina gana greitai.
Rezultatas – modifikuoti limfocitai, kurie susijungia. padidėjęs jautrumas „paslėptų“ antigenų paieškai su geresniu gebėjimu išgyventi ir toliau funkcionuoti naviko „pilyje“. Kelių ekspertų žodžiais tariant, tai būtų naujos kartos CAR-T ląstelės, specialiai skirtas įveikti kietųjų navikų barjerus.
Ikiklinikinių tyrimų rezultatai: naviko išnaikinimas pelių modeliuose
Kai buvo apibūdinta CD70 raiška ir sukurtos HIT ląstelės, komanda išbandė strategiją pacientų modeliuose su inkstų, kiaušidžių ir kasos vėžysŠie ksenograftų modeliai gana tiksliai atkuria žmogaus navikų sudėtingumą ir heterogeniškumą, todėl laikomi reiklia priemone vertinant eksperimentinius gydymo būdus.
Šiuose bandymuose Įprastiniai CAR-T taikiniai CD70 Jiems pavyko efektyviai eliminuoti ląsteles su didele antigenų raiška, tačiau palikti subpopuliacijas su labai mažu arba, regis, visai neegzistuojančiu antigenų lygiu. Šios likusios frakcijos pakako, kad navikas toliau augtų arba laikui bėgant vėl atsirastų, o tai atitinka kuklius ankstesnių klinikinių tyrimų rezultatus.
Kai jie buvo naudojami vietoj anti-CD70 HIT ląstelėsElgesys pastebimai pasikeitė. Tyrėjai aprašė, kad pelėms, sergančioms inkstų, kasos ir kiaušidžių navikais, „Visiškas ir ilgalaikis vėžio išnaikinimas“HIT ląstelės taip pat aptiko ir eliminavo ląsteles su itin maža CD70 ekspresija, taip užkirsdamos kelią klasikiniam naviko ištrūkimui.
Duomenys rodo, kad CD70 yra ypač per daug ekspresuojamas metastaziniai pažeidimaipavyzdžiui, plaučių metastazės iš inkstų vėžio. Kai kuriuose iš šių modelių vienkartinės HIT ląstelių injekcijos pakako navikui išnykti, ir autoriai tai įvardija kaip vieną iš perspektyviausių darbo rezultatų.
Ikiklinikiniai saugumo tyrimai yra vienodai svarbūs. Daugiau nei 30 sveikų audinių tipų Tai rodo, kad CD70 vos ekspresuojamas už naviko ribų, išskyrus kai kurias imuninės sistemos ląsteles, kai jos yra aktyvuojamos. Pelėms Padidėjusio toksiškumo nepastebėta nei aprašyta jau patvirtintoms CAR-T ląstelėms. Net ir tokiu atveju imunologai, tokie kaip Ignacio Melero (Navaros universiteto klinikos) tyrimai rodo, kad tam tikrų imuninių ląstelių eliminacija gali turėti klinikinių pasekmių, kurias reikės atidžiai stebėti.
Konceptualus CAR-T terapijos pokytis kietųjų navikų gydymui
Keletas konsultuotų ekspertų sutinka, kad tyrimas neapsiriboja vien CD70 taikiniu, bet ir pateikia naują konceptualus niuansas, turintis platų poveikį kuriant imunoterapijas kietiems navikams. Apibendrinant Luis Álvarez-VallinaCNIO-HMarBCN imunoterapijos vadovo vadovaujamas darbas rodo, kad Problema yra ne tiek tikslinio antigeno nebuvimasbet srovės receptorių jautrumo stoka.
Ši pakartotinė interpretacija atveria duris kitų antigenų, kurie buvo atmesti dėl akivaizdus per didelis heterogeniškumasJei iš tiesų yra plačiai paplitusi liekamoji raiška, raktas galėtų slypėti vis jautresnių receptorių kūrime kartu su epigenetinėmis strategijomis, kurios neleidžia navikui „sumažinti savo taikinių tūrio“.
Autoriai netgi teigia, kad CD70 yra panumorinis taikinys potencialą, atsižvelgiant į tai, kad jis buvo aptiktas nevienalyčiai daugiau nei dvidešimtyje solidinių navikų, įskaitant glioblastoma ir kasos adenokarcinomaŠis metodas taip pat pasitarnautų kaip metodologinis modelis, skirtas nustatyti kiti „paslėpti tikslai“ kuris iki šiol liko nepastebėtas.
Álvarez-Vallina pabrėžia, kad tyrimas „gerai atitinka ankstesnius įrodymus“ ir kad jo išvadas pagrindžia tvirti duomenys, nors jis tvirtina, kad kalbame apie ikiklinikinių tyrimų su būdingais apribojimaisŽvelgiant į „realųjį pasaulį“, numatomas galimų taikinių, skirtų kietiesiems navikams, katalogo išplėtimas, pacientų atrankos kriterijų pokyčiai ir didesnis reguliavimo sudėtingumaskartu su toksiškumo rizika, jei jautrumas padidėja iki kraštutinio lygio.
Kiti ekspertai atkreipia dėmesį, kad straipsnyje Mokslas išlaiko a geras metodologinis lygis ir kad susijęs pranešimas spaudai pakankamai tiksliai atspindi pagrindinę žinutę, nors jame gali būti pernelyg supaprastintas CD70 „panvėžinis“ pobūdis ir receptoriams taikoma „ultrajautrus“ žymėjimas, kuris iš tikrųjų lyginamas su įprastiniu CAR dizainu, sustiprintu CD80/4-1BBL kostimuliacija.
Poveikis Ispanijai ir Europai: prieiga, kaina ir reguliavimas
Potencialus veiksmingų CAR-T terapijų poveikis kovai su solidiniais navikais yra ypač aktualus tokiose sveikatos priežiūros sistemose kaip Ispanų ir Europoskur šie gydymo būdai jau integruoti, nors indikacijos apsiriboja hematologiniais vėžiais. Pavyzdžiui, Ispanijoje yra penkios komercinės CAR-T terapijos, finansuojamos Nacionalinės sveikatos sistemos nuo leukemijų, limfomų ir mielomų, be dviejų akademinių gydymo būdų, sukurtų Barselonos ligoninės klinikoje.
Šie gydymo būdai turi labai didelės išlaidos vienam pacientuiPramoniniams projektams šios išlaidos gali siekti arba viršyti 300 000 eurų, o kai kuriems akademiniams projektams – apie 90 000 eurų. Norint išplėsti modelį, kad jis apimtų ir solidinius navikus, kurie yra daug dažnesni, reikėtų permąstyti šį požiūrį. finansavimo strategijos, gamybos pajėgumai ir prioritetų nustatymo kriterijai viešosiose sistemose.
Tuo pačiu metu HIT receptorių pagrindu sukurtos terapijos kūrimas kelia papildomų reguliavimo iššūkių. padidėjęs jautrumas Tai reiškia, kad reikia išsamiai įrodyti, jog jie nedidina sunkių toksinių reiškinių rizikos už naviko ribų. Tikėtina, kad to pareikalaus Europos ir nacionalinės agentūros. ilgalaikės stebėsenos programos ir labai kruopštus bandymų planas, siekiant sumažinti riziką ankstyvosiose stadijose.
Šios srities tyrėjai, pavyzdžiui, imunologai Manel Chuan Barselonos klinikos ligoninėje ši nauja strategija vertinama kaip tvirtas koncepcijos įrodymas ...kuriuos būtų galima derinti su kitais metodais (antikūnais, įprastine imunoterapija, epigenetiniais vaistais), siekiant pagerinti atsaką į kietuosius navikus. Tačiau jie tvirtina, kad vis dar reikia daugiau duomenų apie galimas neigiamas poveikis sveikiems audiniams ir apie tai, kaip šios ląstelės elgsis sudėtingoje žmogaus organizmo aplinkoje.
Jei jos veiksmingumas bus patvirtintas, Europai taip pat tektų spręsti tokias problemas kaip decentralizuota ir centralizuota gamyba Šios ląstelių terapijos apima ligoninių centrų mokymus, šalių koordinavimą ir kainų derybas su pramone, taip pat galimą vaistų kūrimą. viešosios akademinės platformos panašios į tas, kurios jau įgyvendintos Katalonijoje ir kituose regionuose.
Iš laboratorijos į kliniką: kitas žingsnis
Šiuo metu darbas su anti-CD70 HIT ląstelėmis yra pradinėje stadijoje. griežtai ikiklinikiniųPats Sadelainas pripažįsta, kad pagrindinis neatidėliotinas iššūkis yra pasiekti reikalingas finansavimas pradėti klinikinius tyrimus su žmonėmis ir konsoliduoti didelio masto gamybos infrastruktūrą, atitinkančią kokybės reikalavimus.
Pasak Kolumbijos komandos, pirmieji tyrimai su žmonėmis planuojami m. pacientams, sergantiems glioblastoma, ūmine mieloidine leukemija, kiaušidžių vėžiu ir kasos vėžiuNors tikimasi, kad iš pradžių bus sutelktas dėmesys į vieną ar dvi indikacijas. Bet kokiu atveju tai būtų bandymai, ankstyvoji fazė (I/II), daugiausia dėmesio skiriant saugumo ir dozavimo vertinimui, o ne galutinio veiksmingumo įrodymui.
Lygiagrečiai tyrėjai dirba ties tobulinti aptikimo metodus CD70 pacientų mėginiuose, nes sprendimas, kam gali būti naudinga terapija, priklausys nuo tikslaus to „spektro“ raiškos įvertinimo. Pažangių vaizdavimo metodų ir genominės analizės įtraukimas gali būti labai svarbus atrenkant žmones, turinčius didesnė atsako tikimybė.
Autoriai ir nepriklausomi ekspertai sutinka, kad nors rezultatai yra „labai padrąsinantys“, dar per anksti daryti prognozes apie jo veiksmingumą. realaus pasaulio vertimas klinikojeDaugelis vėžio gydymo būdų, kurie parodė įspūdingą veiksmingumą pelių modeliuose, vėliau buvo atmesti dėl žmogaus organizmo sudėtingumo ir reguliavimo reikalavimų.
Nepaisant to, šis darbas vėl sužadino mokslo bendruomenės ir biomedicinos sektoriaus susidomėjimą. CAR-T ląstelės kietiems navikamsJei tyrimai su žmonėmis patvirtins didelę dalį šių ikiklinikinių rezultatų, onkologija galėtų įgyti naują įrankį, skirtą gydyti labai blogos prognozės vėžius, tokius kaip kasos adenokarcinoma, tam tikri inkstų navikai arba glioblastomasrityse, kuriose dabartinės pasirinkimo galimybės yra labai ribotos.
Apibendrinus, anti-CD70 HIT ląstelių tyrimai sustiprina idėją, kad ateitis Ląstelinė imunoterapija kietųjų navikų atveju Tai apima receptorių jautrumo didinimą, geresnį taikinių biologijos supratimą ir šių strategijų derinimą su kitais gydymo būdais, visada atliekant griežtą klinikinį vertinimą, siekiant atskirti pagrįstą entuziazmą nuo dar neįrodytų pažadų.